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熒光定量PCR:基因相對錶達量計算方法

熒光定量PCR之後計算目的基因的相對錶達量一般採用2-△△ct的方法。我們還是假設對照組和處理組各有三個生物學重複(即對照組3個cDNA樣品cDNA1, cDNA2, cDNA3,處理組3個cDNA樣品cDNA4, cDNA5, cDNA6),三個技術重複(即每個cDNA的每個基因點三個孔)。

1. 跑完程式後,先看一下溶解曲線。如果熔解曲線的峰比較單一,而且同一個基因的峰基本重合,說明沒問題;如果峰比較雜亂,多峰,甚至壓根沒峰,證明結果不行,要麼引物有問題,要麼加樣有問題,或者程式搞錯了,總之自己要回想一下哪裡出了問題。

2. 將原始ct值按照如下格式輸入excel中。

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