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宏基因組測序及分析

drop 體積 構建 pan 以及 lex 建議 nod 1.8

宏基因組測序:
  1. 濃度>=50ng/ul
  2. OD260/280:1.8-2.0
  3. DNA兩次需要量>=3ug
宏基因組測序需要提供什麽樣品要求? (1)提供環境微生物的基因組DNA或者擴增產物,OD值在1.8~2.0 之間;樣品濃度大於30 ng/ul;每次樣品制備需要10μg樣品,如果需要多次制備樣品,則需要樣品總量=制備樣品次數*10 ug。 (2)DNA樣品請置於-20℃保存;請提供DNA樣品具體濃度、體積、制備時間、溶劑名稱。請同時附上QC數據,包括電泳膠圖、分光光度或Nanodrop儀器檢測數據。 (3)樣品請置於1.5 ml管中,管上註明樣品名稱、濃度以及制備時間,管口使用Parafilm封口。建議使用幹冰運輸,並且盡量選用較快的郵遞方式,以降低運輸過程中樣品降解的可能性。 采用Solexa進行宏基因組測序,測序文庫構建方法及質量控制如何? 答:采用Solexa進行宏基因組 DNA測序,首先對特定環境微生物種群全基因組DNA進行提取。在提取微生物種群的DNA後制備DNA文庫,具體步驟如下: (1)將DNA隨機打斷成200-500bp的片段;
(2)對DNA末端進行修復; (3)將“A”堿基加入到DNA片段的3’末端; (4)在DNA片段的末端加上接頭; (5)純化連接產物; (6)PCR擴增連上接頭的DNA片段; (7)檢測測序文庫。

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