基因編輯學習
阿新 • • 發佈:2022-01-11
中科院植物研究所研究員劉春明團隊與合作者開發出一個簡便高效的多基因編輯工具包Customized Assembly and Simplified Editing(CASE)
gRNA克隆載體和Transgene Killer Construct(TKC)編輯載體進行了優化改造,同時結合此前由tRNA間隔實現gRNA串聯的方法,建立了一個創制多突變體的簡便高效的CASE工具包。
sgRNA 表達框
PKSE401 表達載體
pKSE401 載體含有由 AtU6 啟動子驅動的 g RNA 插入位點和 sgRNA scaffold(骨架),以及由 2x CaMV 35S 啟動子驅動的 Cas9,載體上無熒光蛋白和 GUS 篩選標記。
https://www.addgene.org/62202/
Growth in Bacteria
- Bacterial Resistance(s) Kanamycin
- Growth Temperature 37°C
- Growth Strain(s) DH5alpha
- Copy number High Copy
pKSE401 重組載體的構建;只需將靶標位點 DNA 序列兩端新增接頭後合成,並連線到載體的 gRNA 插入位點上,即構建好重組的 pKSE401 載體